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毛細(xì)管色譜柱的安裝與使用
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更新時(shí)間:2016-05-17
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毛細(xì)管色譜柱的安裝與使用
1、 檢查氣體過(guò)濾器,載氣,進(jìn)樣墊和襯管等。
檢查氣體過(guò)濾器和進(jìn)樣墊,保證輔助氣和檢測(cè)器的通氣暢通,如果以前做過(guò)較臟的樣品或活性較高的化合物樣品,需要將進(jìn)樣口襯管清洗或更換。
2、 將螺母和密封墊裝在色譜柱上,并將色譜柱兩端小心切平,切面要平滑整齊。
3、 將色譜柱連接于進(jìn)樣口上
色譜柱在進(jìn)樣口中插入的深度應(yīng)根據(jù)所使用的GC儀器不同而定,正確合適的插入能zui大可能地保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要性。通常,色譜柱的入口應(yīng)保持在進(jìn)樣口的中下部,即處于進(jìn)樣針穿過(guò)隔墊*插入進(jìn)樣器后針尖與色譜柱入口端相距1-50px,(具體的插入程度和方法參考所使用GC的隨機(jī)手冊(cè))避免用力玩去擠壓毛細(xì)管柱,并注意不要讓標(biāo)記牌等帶有鋒利邊緣的物品與毛細(xì)管柱接觸摩擦,以防毛細(xì)管柱斷裂受損。色譜柱正確插入進(jìn)樣器后,將連接螺母擰上,擰緊后用扳手再多擰1/4-1/2圈,保證安裝的密封程度。安裝不緊密,不僅會(huì)引起裝置的泄漏,而且有可能對(duì)色譜柱造成*損壞。
4、當(dāng)色譜柱與進(jìn)樣口聯(lián)接好后,通入載氣,調(diào)節(jié)柱前壓以得到合適的載氣流速。將色譜柱出口端插入裝有乙烷的樣品瓶中,正常情況下可以看見(jiàn)瓶中穩(wěn)定持續(xù)的氣泡,如果沒(méi)有氣泡產(chǎn)生要重新檢查載氣裝置和流量控制器等是否設(shè)置正確。并檢查整個(gè)氣路有無(wú)泄漏,等所有問(wèn)題解決后,將色譜柱出口端從瓶中去除,保證柱端口伍溶劑殘留,再進(jìn)行下一步的安裝。
5、色譜柱與檢測(cè)器連接
色譜柱與檢測(cè)器的鏈接安裝和所需注意事項(xiàng)和色譜柱與進(jìn)樣口連接大致相同,如果所用檢測(cè)器是ECD貨NPD等,那么在老化色譜柱時(shí),應(yīng)該將色譜柱與檢測(cè)器斷開(kāi),這樣可避免檢測(cè)器被污染。
6、確定載氣流量,再對(duì)色譜柱的安裝進(jìn)行檢查。
注意:如果不通入載氣就對(duì)色譜柱進(jìn)行加熱,會(huì)快速*性的損壞色譜柱。
7、色譜柱的老化
色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后,就可以對(duì)色譜柱進(jìn)行老化,對(duì)色譜柱加熱至恒定溫度,通常取其使用溫度上限,超過(guò)色譜柱的溫度上限極易損壞色譜柱。當(dāng)達(dá)到老化溫度后,記錄并觀察基線,初始階段基線應(yīng)持續(xù)上升,在達(dá)到老化溫度后5-10min開(kāi)始下降,并且會(huì)持續(xù)30-90分鐘。當(dāng)達(dá)到一個(gè)固定的值后,就會(huì)穩(wěn)定下來(lái)。如果在2-3個(gè)小時(shí)后基線仍無(wú)法穩(wěn)定,或者在15-20分鐘后仍無(wú)明顯的下降趨勢(shì),那么有可能系統(tǒng)裝置有泄漏或者污染。遇到這樣的情況,應(yīng)該立即將柱溫降到40度以下,盡快的檢查系統(tǒng)并解決相關(guān)的問(wèn)題。如果繼續(xù)老化,不僅對(duì)色譜柱有損壞,而且始終得不到正常穩(wěn)定的基線。
一般來(lái)講,涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時(shí)間較長(zhǎng),貳弱極性固定相和較薄涂層的色譜柱所需老化時(shí)間較短。而PLOT色譜柱的老化方法又各不相同。需按照色譜柱供應(yīng)商提供的老化條件進(jìn)行老化。
8、設(shè)置確認(rèn)載氣流速
對(duì)于毛細(xì)管色譜柱,使用載氣高純度氮?dú)饣驓錃?,載氣的純度大于99.995%,而其中的含氧量越小越好。
9、柱流失檢測(cè)
在色譜柱老化過(guò)程結(jié)束后,采用程序升溫做一次空白試驗(yàn),一般是從40℃/min從50℃升到zui高使用溫度,達(dá)到zui高使用溫度后保持10min,這樣我們會(huì)得到一張流失圖,這些數(shù)值可以后作對(duì)比試驗(yàn),并且對(duì)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題的解決有幫助。
在空白試驗(yàn)的色譜圖中,不應(yīng)該有色譜峰出現(xiàn),如果出現(xiàn)了色譜峰,通??赡苁皬倪M(jìn)樣口帶來(lái)的污染物,如果在正常使用狀態(tài)下,色譜柱性能開(kāi)始下降,基線的信號(hào)值會(huì)增高,另外,如果在較低的溫度下,色譜柱的保存用進(jìn)樣墊將色譜柱的兩端封住,并放回原包裝,再次安裝時(shí)要將色譜柱的兩端截去一部分,保證沒(méi)有進(jìn)樣墊的碎屑?xì)埩粲谥小?
1、 檢查氣體過(guò)濾器,載氣,進(jìn)樣墊和襯管等。
檢查氣體過(guò)濾器和進(jìn)樣墊,保證輔助氣和檢測(cè)器的通氣暢通,如果以前做過(guò)較臟的樣品或活性較高的化合物樣品,需要將進(jìn)樣口襯管清洗或更換。
2、 將螺母和密封墊裝在色譜柱上,并將色譜柱兩端小心切平,切面要平滑整齊。
3、 將色譜柱連接于進(jìn)樣口上
色譜柱在進(jìn)樣口中插入的深度應(yīng)根據(jù)所使用的GC儀器不同而定,正確合適的插入能zui大可能地保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要性。通常,色譜柱的入口應(yīng)保持在進(jìn)樣口的中下部,即處于進(jìn)樣針穿過(guò)隔墊*插入進(jìn)樣器后針尖與色譜柱入口端相距1-50px,(具體的插入程度和方法參考所使用GC的隨機(jī)手冊(cè))避免用力玩去擠壓毛細(xì)管柱,并注意不要讓標(biāo)記牌等帶有鋒利邊緣的物品與毛細(xì)管柱接觸摩擦,以防毛細(xì)管柱斷裂受損。色譜柱正確插入進(jìn)樣器后,將連接螺母擰上,擰緊后用扳手再多擰1/4-1/2圈,保證安裝的密封程度。安裝不緊密,不僅會(huì)引起裝置的泄漏,而且有可能對(duì)色譜柱造成*損壞。
4、當(dāng)色譜柱與進(jìn)樣口聯(lián)接好后,通入載氣,調(diào)節(jié)柱前壓以得到合適的載氣流速。將色譜柱出口端插入裝有乙烷的樣品瓶中,正常情況下可以看見(jiàn)瓶中穩(wěn)定持續(xù)的氣泡,如果沒(méi)有氣泡產(chǎn)生要重新檢查載氣裝置和流量控制器等是否設(shè)置正確。并檢查整個(gè)氣路有無(wú)泄漏,等所有問(wèn)題解決后,將色譜柱出口端從瓶中去除,保證柱端口伍溶劑殘留,再進(jìn)行下一步的安裝。
5、色譜柱與檢測(cè)器連接
色譜柱與檢測(cè)器的鏈接安裝和所需注意事項(xiàng)和色譜柱與進(jìn)樣口連接大致相同,如果所用檢測(cè)器是ECD貨NPD等,那么在老化色譜柱時(shí),應(yīng)該將色譜柱與檢測(cè)器斷開(kāi),這樣可避免檢測(cè)器被污染。
6、確定載氣流量,再對(duì)色譜柱的安裝進(jìn)行檢查。
注意:如果不通入載氣就對(duì)色譜柱進(jìn)行加熱,會(huì)快速*性的損壞色譜柱。
7、色譜柱的老化
色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后,就可以對(duì)色譜柱進(jìn)行老化,對(duì)色譜柱加熱至恒定溫度,通常取其使用溫度上限,超過(guò)色譜柱的溫度上限極易損壞色譜柱。當(dāng)達(dá)到老化溫度后,記錄并觀察基線,初始階段基線應(yīng)持續(xù)上升,在達(dá)到老化溫度后5-10min開(kāi)始下降,并且會(huì)持續(xù)30-90分鐘。當(dāng)達(dá)到一個(gè)固定的值后,就會(huì)穩(wěn)定下來(lái)。如果在2-3個(gè)小時(shí)后基線仍無(wú)法穩(wěn)定,或者在15-20分鐘后仍無(wú)明顯的下降趨勢(shì),那么有可能系統(tǒng)裝置有泄漏或者污染。遇到這樣的情況,應(yīng)該立即將柱溫降到40度以下,盡快的檢查系統(tǒng)并解決相關(guān)的問(wèn)題。如果繼續(xù)老化,不僅對(duì)色譜柱有損壞,而且始終得不到正常穩(wěn)定的基線。
一般來(lái)講,涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時(shí)間較長(zhǎng),貳弱極性固定相和較薄涂層的色譜柱所需老化時(shí)間較短。而PLOT色譜柱的老化方法又各不相同。需按照色譜柱供應(yīng)商提供的老化條件進(jìn)行老化。
8、設(shè)置確認(rèn)載氣流速
對(duì)于毛細(xì)管色譜柱,使用載氣高純度氮?dú)饣驓錃?,載氣的純度大于99.995%,而其中的含氧量越小越好。
9、柱流失檢測(cè)
在色譜柱老化過(guò)程結(jié)束后,采用程序升溫做一次空白試驗(yàn),一般是從40℃/min從50℃升到zui高使用溫度,達(dá)到zui高使用溫度后保持10min,這樣我們會(huì)得到一張流失圖,這些數(shù)值可以后作對(duì)比試驗(yàn),并且對(duì)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題的解決有幫助。
在空白試驗(yàn)的色譜圖中,不應(yīng)該有色譜峰出現(xiàn),如果出現(xiàn)了色譜峰,通??赡苁皬倪M(jìn)樣口帶來(lái)的污染物,如果在正常使用狀態(tài)下,色譜柱性能開(kāi)始下降,基線的信號(hào)值會(huì)增高,另外,如果在較低的溫度下,色譜柱的保存用進(jìn)樣墊將色譜柱的兩端封住,并放回原包裝,再次安裝時(shí)要將色譜柱的兩端截去一部分,保證沒(méi)有進(jìn)樣墊的碎屑?xì)埩粲谥小?
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