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色譜耗材常見問題(六)

 1、色譜柱的溫度極限,如60℃至240℃/260℃各表示什么?60℃—溫度下限,低于該溫度使用柱效會降低,但不會損傷色譜柱;240℃—恒溫溫度上限,可在此溫度長時間使用;260℃—程序升溫溫度上限,不可超過此溫度,且在此溫度使用不得超過10分鐘。

2、了解有關(guān)液相色譜柱的幾個參數(shù)及安捷倫色譜柱的分類和應(yīng)用范圍表面積——顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和,以m2/gram表示;高表面積對于多組份樣品的分離具有較強(qiáng)的保留能力,柱容量和分離度;表面積低的填料通常能迅速達(dá)到平衡狀態(tài),對于梯度淋洗尤為重要。孔徑——顆粒的孔或腔的平均尺寸,范圍60-10,000Å,大孔的填料顆??梢匝娱L溶質(zhì)大分子在填料表面滯留的時間,達(dá)到充分分離,改善峰形;樣品MW≤4000,選擇80Å的孔徑,樣品MW>4000選擇300Å的孔徑。碳覆蓋率——對色譜分離的影響,與基體物質(zhì)相連的鍵合相的量。高碳覆蓋率:提高分辨率,分析時間長;低碳覆蓋率:縮短運行時間封端/封尾——對色譜分離的影響,使用較短烷烴鏈鍵合游離硅羥基(二次鍵合)封端:減輕待測組份與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象對于極性樣品,未封端與經(jīng)過封端處理的色譜柱在選擇性上有明顯差異粒徑——1.8um3.5um→快速分離;5um→行業(yè)標(biāo)準(zhǔn);7um→制備柱。
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